Comparison of different histological protocols for the preservation and quantification of the intestinal mucus layer in pigs.

The histological characterization of the intestinal mucus layer is important for many scientific experiments investigating the interaction between intestinal microbiota, mucosal immune response and intestinal mucus production. The aim of this study was to examine and compare different fixation protocols for displaying and quantifying the intestinal mucus layer in piglets and to test which histomorphological parameters may correlate with the determined mucus layer thickness. Jejunal and colonal tissue samples of weaned piglets (n=10) were either frozen in liquid nitrogen or chemically fixed using methacarn solution. The frozen tissue samples were cryosectioned and subsequently postfixed using three different postfixatives: paraformaldehyde vapor, neutrally buffered formalin solution and ethanol solution. After dehydration, methacarn fixed tissues were embedded in paraffin wax. Both sections of cryopreserved and methacarn fixed tissue samples were stained with Alcian blue (AB)-PAS followed by the microscopically determination of the mucus layer thickness. Different pH values of the Alcian Blue staining solution and two mucus layer thickness measuring methods were compared. In addition, various histomorphological parameters of methacarn fixed tissue samples were evaluated including the number of goblet cells and the mucin staining area. Cryopreservation in combination with chemical postfixation led to mucus preservation in the colon of piglets allowing mucus thickness measurements. Mucus could be only partly preserved in cryosections of the jejunum impeding any quantitative description of the mucus layer thickness. The application of different postfixations, varying pH values of the AB solution and different mucus layer measuring methods led to comparable results regarding the mucus layer thickness. Methacarn fixation proved to be unsuitable for mucus depiction as only mucus patches were found in the jejunum or a detachment of the mucus layer from the epithelium was observed in the colon. Correlation analyses revealed that the proportion of the mucin staining area per crypt area (relative mucin staining) measured in methacarn fixed tissue samples corresponded to the colonal mucus layer thickness determined in cryopreserved tissue samples. In conclusion, the results showed that cryopreservation using liquid nitrogen followed by chemical postfixation and AB-PAS staining led to a reliable mucus preservation allowing a mucus thickness determination in the colon of pigs. Moreover, the detected relative mucin staining area may serve as a suitable histomorphological parameter for the assessment of the intestinal mucus layer thickness. The findings obtained in this study can be used for the implementation of an improved standard for the histological description of the mucus layer in the colon of pigs.

Retrospective canine skin peripheral nerve sheath tumors data with emphasis on histologic, immunohistochemical and prognostic factors / Dados retrospectivos de tumores de bainha de nervo periférico na pele de cães com ênfase a fatores histológicos, imuno-histoquímicos e prognósticos

In this retrospective study was determined the frequency of canine skin peripheral nerve sheath tumors (PNST) in cases diagnosed by the Setor de Patologia Veterinária of the Universidade Federal do Rio Grande do Sul (SPV-UFRGS), Brazil, between the years 2000 and 2012. The canine profiles, as well as histological, immunohistochemical and prognostic aspects of the tumors were based on 70 samples, comprising 40 females, 29 males and one unspecified sample. Between 2000 and 2012, 2,984 skin tumors of dogs were diagnosed in the SPV-UFRGS, totaling 2.34% of skin neoplasms in dogs. Animals that comprised the largest amount of samples (43%) were those with no breed (SRD), followed by German Shepherds (10%). Females were more affected than males (40/70 - 57% and 29/70 - 41% respectively). Skin PNST of this research showed predominant localization on the limbs (40% in the forelimbs and 29% in the hindlimbs); affecting adult dogs, mostly aged between 8 and 11 years (54%). The samples were routinely processed for hematoxylin and eosin, and were also evaluated by toluidine blue and Masson's trichrome staining, and immunohistochemistry (IHC) anti-vimentin, -S-100, -GFAP, -actin, von Willebrand factor and neurofilament. Anisocytosis and anisokaryosis, mitotic index, intratumoral necrosis, invasion of adjacent tissues, tumor location, local recurrence and metastasis were related to the diagnosis of benign (49/70) or malignant tumor (21/70). The Antoni A histological pattern was observed more frequently in benign tumors. The immunohistochemistry helped to diagnose PNST, and anti-vimentin and anti-protein S-100 showed the highest rates of immunostaining. Throughout statistical analysis of animals with tumor recurrence, it was found that the chance of an animal with a malignant peripheral nerve sheath tumor to develop recurrence is 4.61 times higher than in an animal that had a benign tumor...

Neste estudo retrospectivo foi determinada a frequência dos tumores de bainha de nervo periférico (TBNP) na pele de cães diagnosticados pelo Setor de Patologia Veterinária da Universidade Federal do Rio Grande do Sul (SPV-UFRGS), Brasil, no período de 2000 a 2012. O histórico dos cães, assim como a histologia, a imuno-histoquímica e o prognóstico em relação aos tumores foram baseados em 70 amostras histológicas, correspondendo a 40 fêmeas (57%), 29 machos (41%) e uma amostra sem a informação do sexo. De 2000 a 2012, foram diagnosticados 2984 tumores de pele de cães pelo SPV-UFRGS, totalizando 2,34% das neoplasias em cães. A maior parte das amostras (43%) foi proveniente de animais sem raça definida (SRD), seguidos pelos da raça Pastor Alemão (10%). A localização predominante dos TBNP desta pesquisa ocorreu em membros (40% em membro tóracico e 29% em membro pélvico), afetando principalmente cães de oito a 11 anos idade (54%). As amostras foram processadas rotineiramente para coloração de Hematoxilina e eosina, e foram realizadas as colorações de azul de toluidina e tricrômio de Masson, assim como realizada imuno-histoquímica (IHQ) anti-vimentina, -S-100, -GFAP, -actina, von Willbrand e neurofilamento. Os fatores anisocitose e anisocariose, índice mitótico, necrose intratumoral, invasão tumoral em tecidos adjacentes, localização tumoral, local de recorrência e metástase foram relacionados com o diagnóstico de benignidade (49/70) ou malignidade (21/70). O padrão histológico de Antoni A foi observado com mais frequência em tumores benignos. A IHQ auxiliou no diagnóstico dos TBNP, com maiores índices de imunomarcação anti-vimentina e S-100. A análise estatística das amostras de animais que apresentaram recidiva tumoral evidenciou que a chance de um animal com tumor de bainha de nervo periférico maligno desenvolver recidiva é 4,61 vezes maior do que em animais que apresentam tumor benigno...

Classification in karyometry: performance testing and prediction error.

Classification plays a central role in quantitative histopathology. Success is expressed in terms of the accuracy of prediction for the classification of future data points and an estimate of the prediction error. The prediction error is affected by the chosen procedure, e.g., the use of a training set of data points, a validation set, an independent test set, the sample size and the learning curve of the classification algorithm. For small samples procedures such as the "jackknife," the "leave one out" and the "bootstrap" are recommended in order to arrive at an unbiased estimate of the true prediction error. All of the procedures rest on the assumption that the data set used to derive a classification rule is representative for the diagnostic categories involved. It is this assumption that in quantitative histopathology has to be carefully verified before a clinically generally valid classification procedure can be claimed.

Utilidad de la ecografía transrectal con Doppler color en el diagnóstico del cáncer de próstata. Estudio de 101 casos / Utility of color Doppler transrectal ultrasound in the diagnosis of prostate cancer: a study of 101 cases

Objetivo: Determinar el valor de la ecografía Doppler color en la detección de cáncer de próstata. Relacionar asimetrías de vascularización con los resultados de la biopsia dirigida. Pacientes y métodos: Se incluyen 101 pacientes remitidos entre mayo y noviembre de 2000 por sospecha de cáncer de próstata. Los criterios de selección fueron antígeno prostático específico superior a 3 ng/ml, tacto rectal sospechoso o combinación de ambos. Se valoró volumen, cápsula, arquitectura interna, señalando nódulos y áreas hipoecogénicas sospechosas, y asimetrías de color. Las biopsias se realizaron con aguja de 18 G, mediante la técnica de sextantes, obteniendo además muestras de las áreas de aumento de color. Resultados: La media de edad de los varones incluidos fue de 64,1 ñ 7,89 años. Se diagnosticaron de cáncer 25 pacientes (24,8 por ciento): 22 adenocarcinomas (21,8 por ciento) y 3 (3 por ciento) neoplasias intraepiteliales (PIN).En 48 (47,5 por ciento) el diagnóstico fue hiperplasia benigna y en 26 (25,7 por ciento) prostatitis crónica. Dos pacientes (2 por ciento) fueron diagnosticados de atrofia glandular.El tacto fue sospechoso en 26 casos y considerado normal en 75. De los primeros se confirmó malignidad en 14, lo que indica una sensibilidad de 53,9 por ciento, una especificidad de 85,9 por ciento, un valor predictivo positivo de 53,9 por ciento y un valor predictivo negativo de 85,9 por ciento. En ecografía transrectal (ETR) se clasificaron como sugestivos de benignidad 34 pacientes de los que cinco fueron carcinomas. En 67 casos el estudio demostró alguna anomalía sospechosa de malignidad. De ellos, 20 fueron carcinomas (p = 0,09), lo que da a la ETR en nuestra serie una sensibilidad de 80 por ciento, una especificidad de 38,2 por ciento, un valor predictivo positivo de 29,9 por ciento y un valor predictivo negativo de 85,3 por ciento.En 53 pacientes se encontraron asimetrías de color. El resultado de la biopsia fue de 14 adenocarcinomas y un caso de PIN de alto grado. El resto de asimetrías correspondió a 27 hipertrofias benignas y a 11 prostatitis crónicas. De los 25 cánceres hubo asimetría en 15 casos: 13 fueron hipervasculares y dos hipovasculares. En 10 ocasiones no se encontraron asimetrías vasculares. Conclusiones: La ecografía con Doppler color no puede obviar la biopsia prostática en pacientes con sospecha de cáncer. Puede ayudar a descubrir áreas sospechosas a las que dirigir la aguja de biopsia. El aumento de señal Doppler color no es determinante en el diagnóstico del cáncer. En nuestro estudio el cáncer prostático se presentó con aumento del flujo vascular en un 52 por ciento de casos. En neoplasia confirmada la mayor vascularización se relacionó con un mayor grado Gleason por lo que es recomendable biopsiar las áreas de mayor señal color para determinar el mayor grado Gleason (AU)

Carcinoma infiltrante de mama en biopsias recibidas y diagnosticadas en el Departamento de Patología: Hospital Oscar Danilo Rosales Argüello, León: enero - diciembre 2000 / Infiltrating breast carcinoma in biopsies recaved and diagnosed in the Pathology Departament of the Hospital Oscar Danilo Rosales Argüello, León: january - december 2000

Se realizó un estudio de tipo descriptivo en serie de casos, en el Hospital Escuela "Oscar Danilo Rosales Argüello", en el período comprendido del primero de enero al 30 de noviembre del 2000, a mujeres de diferentes zonas del país que son referidas al departamento de Cirugía por neoformación en la mama y que han sido intervenidas quirurgicamente mediante biopsia y/o mastectomía. El universo de estudio estuvo constituido por 36 casos de carcinoma infiltrante de mama de los que 18 casos (50 porciento) estan comprendidas entre las edades de 36 - 50 años y 18 casos (50 porciento) fueron pacientes por iguales o mayores a 51 años. El carcinoma ductal infiltrante fue el de mayor frecuencia con el mayor número de casos, carcinoma ductal infiltrante grado I con 23 casos, de los cuales 15 casos presentaron metastasis a ganglios linfaticos y con 12 con más de 4 ganglios afectados

Protocolo de lectura histológica de biopsias hepáticas con esteatohepatitis / Protocol for histological readings of hepatic biopsies with steatohepatitis

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Tumor de células granulares de mama. A propósito de tres casos / Granular cell tumor of the breast: a report of the three cases

El tumor de células granulares de mama (TCG) es una neoplasia benigna infrecuente que suele ser indistinguible del cáncer de mama tanto por su presentación clínica como radiológica. La PAAF puede ser útil para sugerir el diagnóstico, no obstante el examen histológico es esencial para hacer el diagnóstico correcto. Debe considerarse este tumor benigno entre las posibilidades diagnósticas cuando nos encontramos ante una lesión con hallazgos mamográficos y ecográficos de alta probabilidad de malignidad. Presentamos tres casos de TCG de mama que simulaban un cáncer primario de mama. El diagnóstico fue de neoplasia benigna y el tratamiento la escisión local, evitándose la mastectomía y el vaciamiento axilar. (AU)

Neoplasias malignas del ovario diagnósticados en el departamento de patología en el período de enero 1996 a diciembre 1999

El presente estudio es descriptivo, retrospectivo, de corte transversal, serie de casos en el que revisaron los Tumores Malignos del Ovario diagnosticados en el Departamento de patología del Hospital Escuela Oscar Danilo Rosales Argüello (HEODRA) en el período enero 1996 a diciembre 1999. Se encontraron 25 casos de Neoplasias malignas de Ovario y el mayor número estaba en los grupos de 31-45, 46-60 y mayores de 60 años con 24 porciento respectivamente, el grupo de 15 años o menos tuvo el menor número con 12 porciento. En relación a la sintomatología el dolor abdominal, mas abdominal o pélvica y sensación de peso en bajo vientre fueron los más comunes con 76 , 68 y 48 porciento respectivamente. El dolor lumbar, las dismenorrea y dispareunia se presentó sólo en el 4 porciento de los casos. Los antecedentes gineco-obstétrico reflejan que el 60 porciento de pacientes tienen cuatro partos o más y sólo el 20 porciento refirió haber usado gestágenos orales. Los procedimientos quirúrgicos efectuados fueron en orden descentes de frecuencia, Panhistectomía y biopsia de correderas parietocólicas 24 porciento, Histerectomía y Salpingoforectomía y cuña de ovario contralateral 20 porciento. La salpingooforectomía unilateral y muestra peritoneal sólo se efectuó en un 4 porciento. La clasificación histopatológica de las neoplasias malignas de ovario fue la siguiente: tumores derivados del epitelio de superficie con 40 porciento, tumores de células germinales 28 porciento, tumores del estroma y cordones sexuales 20 porciento tumores metastásicos 12 porciento. Los tumores mas comunes fueron los carcinomas serosos 22 porciento con 55 años tumores de células granulosas 23 porciento con 53 años y teratoma maligno 13.5 porciento con 24 años, los más raros fueron Tumor de Brenner, carcinoma indiferenciado y carcinoma mucinoso con 4.5 porciento. Los únicos casos diagnosticados en menores de 15 años con tumores de células germinales. Los estadíos clínicos de las neoplasias malignas primarias reflejan que el 64 porciento de casos estaban entre los estadíos II-IV al momento de la cirugía de esta un 18 porciento ya se encontraba en estadío IV

Avaliaçäo da homogeneidade da amostra em morfometria / Evaluation of the sample homogeneity in morphometry

Os autores apresentam com intuito de divulgaçäo, um método para se verificar a homogeneidade da amostra na avaliaçäo morfométrica do número de células, da densidade de volume e da densidade de superfície. O esquema apresentado permitirá ao pesquisador na fase de planejamento do trabalho, determinar à partir de contagens preliminares, o tamanho mínimo da amostra (número de campos ou de eletromicrografias) necessário para a obtençäo de resultados cientificamente consistentes, o que permitirá uma grande economia no consumo de tempo

Avaliaçäo dos níveis de lipídios, lipoproteínas, apoproteínas e o papel da lipoproteína(a) na desenvolvimento de aterosclerose e alterações fibrinolíticas nos pacientes portadores de hanseníase virchoviana / Avaliation of lipidis levels, lipoproteins, apoproteins and lixoproteins paper at atherosclerosis development and altering fibrinolitics

Muitos portadores de hanseníase virchoviana, após longo tempo de evoluçäo, apresentam alterações dérmicas muito semelhantes aos xantonas e seus exames histológicos mostram numerosos macrófagos carregados de material lipídico. Esses fatos, associados a alteraçöes humorais dos lipídios descritas na literatura, sugerindo alteraçöes no metabolismo dos mesmos, levou-nos a estudos, visando a estabelecer valores médios em pacientes, utilizando-se de novas determinaçöes lipoprotêicas e de apoproteínas muito mais precisas. A lipoproteína(a) apresentou valor médio acima de 20 mg/dl em 64,6(por cento) dos pacientes, contra 33,3(por cento) no grupo controle. O encontro de lipoproteína(a) aumentada em pacientes portadores de hanseníase virchoviana é importante, porque existe uma comprovada relaçäo entre esta lipoproteína e alteraçöes vasculares tipo ateroscleróticas e distúrbios na fibrinólise